更新時間:2024-11-23
AH109 感受態(tài)細胞100ul*50菌株一種常用于質??寺〉木?。其φ80lacZΔM15基因的產物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實現a互補,可用于藍白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質粒DNA的提取。
AH109 感受態(tài)細胞100ul*50以下是的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質粒DNA(轉化效率較高,*次使用前做預實驗確定所加質粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
AH109 感受態(tài)細胞100ul*503. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項
1. 加入質粒時體積不應大于感受態(tài)體積的1/10;質粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉化效率急劇下降;質粒增大一倍,轉化效率下降一個數量級。
AH109 感受態(tài)細胞100ul*502. 混入質粒時應輕柔操作。轉化高濃度的質??上鄳獪p少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應減少質粒用量。
4. 濃度不應高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農桿菌生長,會降低其生長速度和轉化效率。本公司感受態(tài)計算轉化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農桿菌;根據所用菌株抗性加入Ti質粒篩選抗生素可防止Ti質粒丟失,但Ti質粒篩選抗生素不利于農桿菌的轉基因操作,所以一般培養(yǎng)農桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質粒丟失的概率極低(可以忽略)。
AFP 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 規(guī)格: 48T/96T
fMet 人甲酰 規(guī)格: 48T/96T
PGD2-MOX 人甲肟前列腺素D2 規(guī)格: 48T/96T
Methylase 人甲基化酶 規(guī)格: 48T/96T
MTX 人喋呤 規(guī)格: 48T/96T
PV-IgG 人脊髓灰質炎病毒IgG 規(guī)格: 48T/96T
CSF 人集落刺激因子 規(guī)格: 48T/96T
VLDLR 人極低密度脂蛋白受體 規(guī)格: 48T/96T
KLK 8 人8 規(guī)格: 48T/96T
KLK 6 人6 規(guī)格: 48T/96T
KLK 11 人11 規(guī)格: 48T/96T
KLK 10 人10 規(guī)格: 48T/96T
KLK 1 人1 規(guī)格: 48T/96T
CKMB 人激動異構酶/細胞分裂素MB 規(guī)格: 48T/96T
SDF-1β/CXCL12 人基質細胞衍生因子1β 規(guī)格: 48T/96T
SDF-1a/CXCL12 人基質細胞衍生因子1a 規(guī)格: 48T/96T
ST3 人基質裂解素 規(guī)格: 48T/96T
ST2 人基質裂解素 規(guī)格: 48T/96T
ST1 人基質裂解素 規(guī)格: 48T/96T
MAT 人基質裂解蛋白 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-1 人基質金屬蛋白酶組織抑制因子1 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-4 人基質金屬蛋白酶抑制因子4 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-3 人基質金屬蛋白酶抑制因子3 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-2 人基質金屬蛋白酶抑制因子2 規(guī)格: 48T/96T
TIMP-1 人基質金屬蛋白酶抑制因子1 規(guī)格: 48T/96T
MMP-9/Gelatinase B 人基質金屬蛋白酶9/明膠酶B 規(guī)格: 48T/96T
MMP-8 人基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶 規(guī)格: 48T/96T
MMP-7 人基質金屬蛋白酶7 規(guī)格: 48T/96T
MMP-5 人基質金屬蛋白酶5 規(guī)格: 48T/96T
MMP-4 人基質金屬蛋白酶4 規(guī)格: 48T/96T
MMP-3 人基質金屬蛋白酶3 規(guī)格: 48T/96T
MMP-2 人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A 規(guī)格: 48T/96T
MMP-13 人基質金屬蛋白酶13 規(guī)格: 48T/96T
AH109 感受態(tài)細胞100ul*50 MMP11 人基質金屬蛋白酶11 規(guī)格: 48T/96T
MMP-10 人基質金屬蛋白酶10 規(guī)格: 48T/96T
MMP-1 人基質金屬蛋白酶1 規(guī)格: 48T/96T